产品简介:
本产品是基于硅胶膜离心吸附柱原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组 DNA 的试剂。
产品特点:
提取的基因组 DNA 纯净,OD260/280 在 1.8-2.0 之间,不含蛋白质和RNA 污染。
可直接用于后续的 PCR、酶切、杂交等实验。
产量高,一般为 1-10 ug/mL 全血(对哺乳动物血液)。
操作简单,整个过程约 20 分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
用量广泛,每次可以处理少达 20 uL(对禽类动物血液)或多达 1 mL 的血液(对哺乳动物血液)。
安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
本产品仅供科研实验,不可用于诊断或治疗用途!不可用于食品或化妆品用途!
产品组成成分及规格:
编号 | 成分 | 50T |
试剂一 | 红细胞裂解液(DNA 纯化用) | 25ml |
试剂二 | 血液 DNA 纯化溶液 A | 25ml |
试剂三 | 离心吸附柱 | 50套 |
试剂四 | 通用洗柱液 | 50ml |
试剂五 | DNA 洗脱液(基因组纯化专用) | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件及有效期:常温运输和保存、有效期一年
自备试剂:无
操作步骤:
1. 将 0.5 mL 红细胞裂解液(DNA 纯化用)加入到 0.02-1 mL 新鲜或抗凝血液中,如果是冷冻血液,需要先 37℃水浴融化再加入红细胞裂解液(DNA 纯化用),吹打混匀。
注意:红细胞裂解液(DNA 纯化用)非常容易长菌,取用需要在无菌条件下进行。
a. 哺乳动物,血液使用量以 300 uL 以下为宜,使用量越大产量越高,但产率会降低。如果血液多于 300 uL,重复 1-2 步两次可以提高产率。
b. 禽类动物,血液使用量以 20 uL 以下为宜,可以从第 3 步做起。
2. 室温 12,000-15,000 rpm 离心 5 分钟,沉淀呈粉红色,小心倾去上清。
3. 再短暂离心半分钟,吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解,但一般可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入 0.5 mL 血液 DNA 纯化溶液 A(血液 DNA 纯化溶液 A 有少量晶体沉淀,用前需要摇晃均匀),用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞,释放 DNA,所以吹打越充分越好。
5. 静置 2 分钟待溶液变清亮后,将液体转移到离心吸附柱中并静置 2-5 分钟,以使 DNA与硅胶膜充分结合。
6. 12000-15000 g 室温离心 2 分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
7. 加入 0.7 mL 的通用洗柱液,12,000 rpm 离心半分钟,弃收集管中的废液。
8. 加入 0.3 mL 的通用洗柱液,12,000 rpm 离心半分钟,弃收集管中的废液。
9. 12,000 rpm 离心半分钟,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通用洗柱液,否则会影响后续反应。
10. 将离心吸附柱置于一新的 1.5 mL 塑料离心管(自备)中,加入适量 50uL DNA 洗脱液(基因组纯化专用),室温放置 2 分钟。如果将 DNA 洗脱液在 65℃预热后再使用,洗脱 DNA 的效果会更好。
11. 12,000 rpm 离心半分钟,离心管底溶液即 DNA 溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。
注意事项:
使用时应注意无菌操作,避免污染。
为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理。
本公司仅供产品质量负责,不对任何实验结果、数据等担保。不对产品以外的任何仪器/耗材/试剂等等相关费用承担。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科学研究使用,不能用于人、动物的医疗或诊断程序,不能使用本产品作为食品、化妆品或家庭用品等。您使用本产品必须遵守产品说明页上适用的全部许可
要求。如不按照说明书操作导致的售后问题本公司不予处理