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K599发根农杆菌
| 产品名称 | K599发根农杆菌 |
| 商品货号 | KL10786KRA |
| 基本信息 | 质粒名称K599发根农杆菌产品货号KL10786KRA载体宿主载体用途出品公司基因类型原核抗性真核抗性荧光蛋白 |
| 使用说明 | |
| 质粒干粉(常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必先转化提质粒后使用)①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作);③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min;④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另外不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。 | |
| 图谱 |
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