BL21(DE3)感受态细胞 

中文名称：BL21(DE3)感受态细胞 

货号：KL10101-01 

英文名称：BL21(DE3) Chemically Competent Cell 

产品规格:

保存条件(保质期)： -80℃ （6 个月） 

基因型：F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm(DE3) 

产品说明：BL21 (DE3)感受态细胞用于高效表达克隆于含 有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如pET 系列)的基因。人噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶，该区整合于 BL21的染色体上， 所以称为 BL21(DE3)O 可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，用于 pET 系列，pGEX, pMAL 等质粒的蛋白表达。 

BL21 (DE3)感受态细胞由特殊工艺制作，经 PUC19 质粒检测转化效率达108cfu/ug 

操作方法： 

1. 取 100ul 冰上融化的 BL21 (DE3)感受态细胞，加 入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。

2. 42C 水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低 转化效率。

3. 向离心管中加入700ul 不含抗生素的无菌2YT 或LB 培养基，混 匀后 37°C, 200rpm复苏 60 分钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100ul 左右上清轻轻吹打重悬 菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。

5. 将平板倒置放于 37C 培养箱过夜培养。T

注意事项： 

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时，IPTG 浓度可选(0. 1-2mM 均可)。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG 浓度需实 验者优化。