1、脂质体转染法：

阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。

优点：操作简单、转染率高、可转染DNA、RNA蛋白质。

缺点：有些细胞系不容易转染，需要进行条件优化，

2.电穿孔转染法：

电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或几乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂，可以大大的降低细胞的死亡率，同时提高电穿孔转染效率。

优点：原理简单、不需要载体、不限制细胞类型和条件，

缺点：需要特殊的设备，对细胞伤害很大，细胞死亡率高。

3、病毒感染：

对于脂质转染于电穿孔转染都无法成功转染的细胞建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。

优点：高转染效率，适用于较难转染的细胞系，可用于体内转染。

缺点：技术难度高，构建重组蛋白是费时，存在生物安全问题，基因插入大小受限。

4、磷酸钙共沉淀法：

该方法可重复性差，而且磷酸钙溶液对温度，PH和缓冲盐浓度的变化十分敏感，对细胞尤其是原代细胞毒性较大，也不能采用RPMI培养基，因为其含有高浓度的磷酸盐。

优点：便宜且容易获得，转染效率高，适用于生产是和稳定的蛋白质。

缺点：可重复性较差，不适用于动物体内转染，有细胞毒性，尤其对原代细胞

组织培养试剂：

基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如，RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸，葡萄糖)，维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物质，如HEPES，当暴露于光照下就会分解产生细胞毒性物质。另外，血清，添加剂，来自于培养箱内的污染物、化学物质，或真菌/细胞的污染也都可能影响到细胞生理。

细胞生长状态：

密切观察细胞，确保它们状态良好，贴壁细胞相比较悬浮细胞—在转染效率方面贴壁细胞和悬浮细胞之间的差异显著，天生趋于悬浮的细胞非常难以转染，相反，天生为贴壁的细胞则可适应悬浮生长的条件，

载体DNA：

载体的完整性是载体是否具有功能取决于他结构的完整性，转染效率受到质粒制备物的超螺旋结构和舒展结构之间比列、涮螺旋终端、核酸酶的降解，以及来自于储存和处理过程中的物理压力的影响。